Result Togel Oregon 9

Result Togel Oregon 9 – Lembaga Pemasyarakatan Negara Bagian Oregon “merayakan” hari jadinya yang ke-150 minggu lalu. 150 tahun adalah waktu yang lama di Wilayah Pantai Barat; Sebagai perbandingan, Universitas Negeri Oregon mendekati usia 150 tahun sejak didirikan pada tahun 1868, tetapi penjara tertua di negara bagian itu telah ada lebih lama dari kampus hibah tanahnya.

Tapi haruskah kita merayakan umur panjang penjara negara? Seorang teman dan kolega lokal mengajari pejabat lokal: Apa yang harus dirayakan? Dengan 1 dari 100 di penjara dan lebih banyak lagi di penjara, bukankah sistem penjara kita saat ini dianggap sebagai kegagalan besar? Dan jika mereka keluar, menghadapi stigma hukuman pidana akan semakin mengurangi peluang hidup mereka dan peluang reintegrasi yang berhasil.

Result Togel Oregon 9

Untuk menambah kejutan dari situasi ini, pria yang dipenjara di Penjara Negara Bagian Oregon dikunci selama liburan sehingga selebritas dapat merayakan hari jadi tanpa harus khawatir tentang kontak yang sebenarnya dengan narapidana (atau orang dewasa yang “dipenjara”). sekarang menjadi label yang direkomendasikan oleh pemerintah). Jadi, bagi para narapidana, “liburan” Jubilee ini terbatas pada sel mereka di mana mereka tidak dapat bekerja di tempat kerja, pergi ke kelas atau kelompok, pergi ke lapangan untuk berolahraga atau menyegarkan diri. udara.

Oregon (or) Lottery

Saya suka OSP sebagai penjara dan saya menghabiskan banyak waktu bekerja dengan para pria di sana. Namun alih-alih merayakan satu setengah abad pria di penjara, peringatan 150 tahun sepertinya harus menjadi waktu untuk berefleksi dan memikirkan masa depan. Keterlibatan editor dan peninjau adalah informasi terbaru tentang profil Research Loop mereka dan mungkin tidak mencerminkan status mereka pada saat peninjauan.

Saat ini, upaya besar sedang dilakukan untuk memahami mekanisme molekuler yang mendasari neuroplastisitas struktural. Selain itu, mengidentifikasi jalur pensinyalan yang terlibat dalam perkembangan psikosis dapat membantu menemukan target terapi. Mutasi genetik atau perubahan ekspresi GPM6A telah dikaitkan dengan gangguan neurologis seperti skizofrenia, depresi, dan penyakit Alzheimer. GPM6A mengkodekan permukaan neuron glikoprotein M6a, yang mendorong pembentukan filopodia/duri, dendrit, dan sinapsis melalui mekanisme yang tidak diketahui. Sejumlah besar bukti menunjukkan bahwa lingkaran luar M6a berperan. Namun, protein yang mengikatnya dan mengatur neuroplastisitasnya belum teridentifikasi. Untuk menjawab pertanyaan ini, kami membuat protein chimeric yang mengandung loop M6a tambahan dengan sampel hippocampal dari tikus yang mengalami imunosupresi setelah TMT / MS. Di sini, kami melaporkan 72 protein yang berinteraksi dengan loop aksesori M6a dan relevan untuk memodulasi fungsinya. Analisis ontologi gen (GO) menunjukkan bahwa 63% protein M6a termasuk dalam kategori “sinaps”, “proyeksi saraf” (51%) dan “presinaptik” (49%) yang terletak di kedua sisi celah sinaptik . Dalam konteks ini, kami telah menunjukkan bahwa M6a asli berinteraksi dengan Piccolo, protein vesikel sinaptik 2B dan sinapsin 1 pada neuron hippocampal dewasa. Menariknya, sekitar 28% dari protein yang tersisa dikaitkan dengan “selubung mielin”, yang menunjukkan bahwa M6a dapat berinteraksi dengan protein permukaan oligodendrosit. Memang, kami menunjukkan interaksi (cis dan trans) antara M6a dan protein proteolipid (PLP) dalam sel neuroblastoma N2a. Akhirnya, 72 protein dianalisis oleh DeGenet untuk gen dan varian terkait penyakit. Selain penyakit terkait M6a, banyak protein telah dikaitkan dengan “autisme”, “epilepsi”, dan “syok”, menambah spektrum gangguan di mana M6a mungkin berperan. Data tersedia melalui ProteomeExchange dengan pengidentifikasi PXD017347.

Ringkasan gambar. Gambar sunburst dari analisis SynGO tentang potensi interaksi M6a (//www.syngoportal.org/, Koopmans et al., 2019). Karya ini menunjukkan kombinasi analisis imunopresipitasi dan spektrometri massa tandem (TMT/MS) untuk mengidentifikasi interaksi protein-protein. Menggunakan protein chimeric yang mengandung loop ekstraseluler dari neuronal glycoprotein M6a, kami melakukan IP pada sampel hippocampal tikus diikuti oleh TMT/MS. Analisis data mengidentifikasi 72 interaksi loop M6a potensial, 45 di antaranya terkait dengan lokalisasi sinaptik.

Membran glikoprotein M6a milik keluarga tetraspan PLP, termasuk protein proteolipid PLP1, DM20, dan M6b (Schweitzer et al., 2006). M6a adalah protein permukaan sel saraf yang mempromosikan diferensiasi sel induk saraf, migrasi, pertumbuhan neuron, penyisipan filopodia / tulang belakang, dan pembentukan sinaps pada neuron primer dan garis sel saraf (Alphonso et al., 2005; Michibata et al., 2008 et al. . . , 2008; Michibata et al., 2009; Formoso et al., 2015a, b, 2016; Garcia et al., 2017; Honda et al., 2017). Pada manusia, variasi atau polimorfisme pada tingkat M6a di GPM6A telah dikaitkan dengan depresi, skizofrenia, klaustrofobia, gangguan bipolar, dan ketidakmampuan belajar (Box et al., 2008; Greenwood et al., 2012; El-Cordy et al.) ; Gregor dan rekan, 2014; Fuchsova et al., 2015). Ekspresi Gpm6a yang berubah pada tikus telah dikaitkan dengan stres / depresi kronis, autisme, dan penyakit Alzheimer (Alphonso et al., 2005; El-Cordy et al., 2013; Lachen-Montes et al., 2016). Namun, mekanisme pasti dimana M6a terlibat dalam plastisitas sinaptik dan bagaimana kaitannya dengan timbulnya penyakit masih belum jelas.

Watson, Gaulke, And Tsikitis:

Prediksi morfologis menunjukkan bahwa anggota keluarga M6a dan PLP memiliki kesamaan struktural dengan keluarga tetraspanin dengan empat domain transmembran (TM), dua loop ekstraseluler (EC1 dan EC2), satu loop intraseluler (IC) dan N- dan C-termini mereka saling berhadapan. lainnya. . sitoplasma sel (Gambar 1A). Tetraspanin adalah molekul di mana-mana yang terlibat dalam adhesi sel, migrasi, proliferasi, dan diferensiasi melalui sel-sel, matriks-sel, dan kontak lateral membran plasma. Setiap tetraspanin dapat berinteraksi dengan protein mitra dalam rakitan dinamis yang membentuk mikrodomain kaya tetraspanin (TEM) yang mewakili platform fungsional (Yanez-Mo et al., 2009; Skorticati et al., 2011). Dengan demikian, tetraspanin spesifik bertindak dalam tipe sel yang berbeda berdasarkan hubungan heterotipiknya dengan protein pasangan yang berbeda. Dalam hal ini, sejumlah besar molekul pasangan yang berbeda dapat menjelaskan mengapa tetraspanin terlibat dalam berbagai proses seluler yang penting. Studi mutagenesis dari loop ekstra tetraspanin telah menunjukkan kepentingannya dalam spesifisitas interaksi protein-protein. Khususnya, EC2 berisi semua situs interaksi protein-protein tetraspanin yang diketahui, dan antibodi monoklonal yang mengenali epitop permukaan sel sejauh ini hanya mengenali domain EC2. Di sisi lain, EC1 penting untuk ekspresi permukaan protein yang benar dan bertanggung jawab untuk pengikatan ke interaksitor EC2 (Murru et al., 2018).

Gambar 1. Alur kerja: co-imunopresipitasi dan deteksi protein dari protein chimeric. ( A ) Representasi skematis dari M6a: ini berisi empat domain transmembran (TM1-4), dua loop ekstraseluler, kecil (EC1) dan besar (EC2), loop intraseluler (IC), dan N- dan C-terminus. Sitoplasma sel. (B) Diagram protein chimeric: struktur M6a-loop. Mouse M6a EC1 dan EC2 (urutan referensi NCBI: NP_835206.1) diklon ke dalam plasmid pBig. Kotak putih: promotor CMV, kotak biru: peptida sinyal sekresi, SEC, kotak merah: EC1, EC2 dan peptida polilinker, kotak oranye: urutan sekresi IgE, kotak hijau: tag SV5 dan kotak merah muda: tag akseptor biotin (BAP). ( C ) Sel M6a-loops-HEK293 diberi label dengan M6a-mAb anti-struktural (magenta) dan anti-SV5-mAb (hijau), dan superposisi kedua saluran ditampilkan dalam warna putih (gabungan). Inti sel diwarnai dengan DAPI. Bilah skala: 30 µm. ( D ) Perwakilan western blot (panel atas) dan dot blot (DB, panel bawah) dari ekstrak sel (CE) dan supernatan pekat (SN) dari sel M6a-loop-HEK293 dan media kultur, masing-masing. Sel HEK293 yang tidak ditransfeksi digunakan sebagai kontrol negatif. Homogenat hipokampus tikus digunakan sebagai kontrol positif untuk DB. Anti-SV5-mAb dan Streptavidin-HRP digunakan untuk menentukan ekspresi dan sekresi M6a-loop. SD dilakukan dalam kondisi non-pribumi, menggunakan 1 μl SN (0,5 mg/ml) dan 5 μl loop M6a. ( E ) Perwakilan bagian barat hippocampus tikus dari hari pascakelahiran 0 (P0) hingga P30. Anti-M6a: COOH dan antibodi primer antitubulin digunakan sebagai kontrol pemuatan. (F) Alur kerja eksperimental Co-IP-TMT/MS. Loop M6a ditangkap dengan anti-SV5-mAb terkonjugasi dengan manik-manik magnetik protein A. Ekstrak protein homogenat hippocampal dari hari postnatal 14, 21, dan 30 tikus (n = 3 hewan, satu hewan P per hari percobaan) kemudian diimunisasi dengan loop M6a. Sebanyak tiga co-IP dilakukan dengan duplikatnya (n = 9). Protein yang dielusi menjadi sasaran pencernaan enzimatik dan peptida menjadi sasaran TMT/MS. Akhirnya, kami melakukan analisis data dan analisis pengayaan Gene Ontology (GO) untuk mengonfirmasi hasil ini.

Dalam kasus M6a, ada bukti kuat bahwa loop tambahan M6a berkontribusi pada fungsinya. Misalnya, paparan neuron hippocampal terhadap antibodi monoklonal (M6a-mAb) yang mengenali loop ekstraseluler M6a menghambat perkembangan neurit dan pembentukan sinaps (Logenauer et al., 1992; Formoso et al., 2015a; Garcia et al. ). . Perawatan M6a-mAb menginduksi endositosis M6a, memisahkan fragmen kerusakan dan menghancurkan plastisitas. Selain itu, residu sistein spesifik dalam EC2 dari M6a memainkan peran penting dalam pembentukan lipatan dan filopodia (Fuchsova et al., 2009). Sebagai kesimpulan, kami et al

Leave a Comment

Your email address will not be published. Required fields are marked *

[X] Tutup Iklan